Ферментний спектр крові в діагностиці хвороб печінки і жовчного міхура

Відео: Печінка. Жовчний Пузир, Підшлункова залоза. Хвороби і лікування. Фролов Ю.О. 15 р

Добре відомо, що зміна активності тканинних ферментів спостерігається при ураженнях печінки різної етіології та генезу, не є специфічним для будь-якого захворювання і пов`язане з характером морфологічних змін органу. Разом з тим, зіставлення спектру ензимів в тканинах і сироватках в поєднанні з клінічними ознаками хвороби дозволяє скласти певне уявлення про характер процесу і його локалізації.

Для діагностики та диференціальної діагностики паренхіматозного ураження печінки найбільше значення набуває визначення активності трансаміназ, лужної фосфатази, фруктозо-монофосфат-альдолази, глютаматдегідрогенази, ізоцитратдегідрогенази та інших ензимів, т. Е. Ферментів, локалізованих в різних клітинних структурах.

Спеціально слід зазначити, що Englhardt на підставі проведених нею детальних досліджень ензімних спектрів тканин при фізіологічних і патологічних умовах прийшла до висновку про те, що сироватковий спектр не є дзеркальним відображенням внутрішньоклітинних змін.

Трактування різних змін спектра ензимів при ураженні органів і тканин може бути зроблена лише з урахуванням зв`язку ензимів зі структурою і функціями органу. Активність ензимів в сироватці крові є кількісним показником ураження паренхіми печінки. Це положення в свою чергу стосується і рівня активності цитоплазматичних ензимів.

З великого числа ензимів, розташованих в різних клітинних структурах, лише цитоплазматические щодо рухливі і можуть бути виявлені в плазмі крові навіть при обмеженому пошкодженні клітинних мембран, в той час як мітохондріальні, мікросомальні, рибосомальні, ендоплазматичний і інші ензими надходять у кров`яне русло лише при загибелі клітини.

К. Г. Капетанакі розглядає збільшення активності трансаміназ в якості надійного ознаки пошкодження гепатоцитів.

Активність глютамінощавелевоуксусной трансамінази (ГЩТ). Ступінь підвищення активності ГЩТ і розміри некрозів в паренхімі печінки знаходяться в прямо пропорційній залежності.

Необхідно особливо відзначити, що вивчення изоферментов ГЩТ набуває особливого діагностичне значення, так як дозволяє встановити не тільки інтенсивність ураження органу, а й локалізацію пошкодження на рівні клітини.

Активність глютамінопіровіноградной трансамінази (ГІТ). У 1937 р А. Е. Браунштейн і М. Г. Крицман відкрили нову реакцію переамінування амінокислот, яка виявилася основним метаболічним шляхом розпаду і синтезу амінокислот в тварин, рослинних і мікробних організмах.

У новонароджених в перші 10 днів життя активність ГПТ знаходиться в межах до 90 од., А ГЩТ - до 120 од. Надалі рівень ферментів не перевищує показників дорослих. За даними К. Г. Капетанакі, активність ГПТ у дорослих знаходиться в межах до 30 од., А ГЩТ - до 40 од. Аналогічні дані наведені в дослідженнях І. В. Гользанд, А. Ф. Блюгер і багатьох інших.

Підвищення активності трансаміназ в сироватці крові Bodansky пояснює переходом ензимів з клітин у кров`яне русло в зв`язку зі зміною цілісності клітинних мембран і мікроструктур клітин.

При фізіологічних желтухах новонароджених ітрансаміназная активність сироватки не збільшується.

Разом з тим, неонатальний гепатит, який є наслідком гемолитического стану, викликаного несумісністю групи крові матері і дитини з утворенням аутоантитіл до еритроцитів немовляти, супроводжується транзиторним підвищенням активності ГПТ і ГЩТ.

При біліарної атрезії активністьтрансаміназ зростає прогресивно, відповідно тяжкості ураження паренхіми печінки.

Таке наростання активності ензимів відбувається, як правило, поступово, досягаючи максимального рівня до 1,5-2 міс. життя.

При гемолітичних жовтяниці, що не супроводжуються ушкодженням паренхіми печінки, активністьтрансаміназ не перевищує межі фізіологічної норми або ж підвищена незначно.

Неускладнений холецистит, як правило, не супроводжується збільшенням активності трансаміназ.

При механічних жовтяниці (викликаних жовчнокам`яну хворобу і холецистит), що призводять до тривалого спазму жовчовивідних шляхів, а також при пухлинах активністьтрансаміназ помірно збільшена на тлі значної гіпербілірубінемії, на противагу вірусному гепатиту, при якому активністьтрансаміназ значно зростає.

На думку Straus з співавт., Дослідження активності ГПТ і лужної фосфатази надає безсумнівну допомогу в диференціальної діагностики між обтураційній і паренхіматозними ураженнями.

Найбільшого поширення в нашій країні отримали такі методи визначення трансаміназ: метод Umbright і ін. В модифікації Т. С. Пасхін і метод Reitman і Frankel в модифікації К. Г. Капетанакі. Ми вважаємо за краще метод Райтмана і Френкеля, оскільки діапазон активності ферменту, який визначається за цією методикою, при патології вельми великий, що дозволяє використовувати даний показник для диференціальної діагностики. За цим методом дослідження фізіологічна норма для ГПТ знаходиться в межах 5,0- 40,5 од, ГЩТ-5,0-52,1 од. активності.

Таким чином, визначення активності трансаміназ, особливо піровиноградної, слід розглядати як вельми надійного тесту для діагностики паренхіматозного ураження печінки.

Фруктозомонофосфатальдолаза (ФМФА) відкрита в 1953 р Ензим розташований переважно в цитоплазмі гепатоцитів і відноситься до групи органоспецифічних ензимів. Збільшення активності ФМФА понад 4 од. переконливо свідчить на користь ушкодження паренхіми печінки. Так, за даними І. І. Зубіковой, при вірусному гепатиті збільшення активності ФМФА реєструється в 90-100% випадків.

За даними деяких авторів, кратність збільшення активності ФМФА при паренхіматозний гепатит (вірусний гепатит) перевершує збільшення всіх ферментів. За даними нашої клініки (Л. А. Попова), середні показники активності ензиму у здорових людей складають 0,9 ± 0,2 од., А у хворих на вірусний гепатит в 100% випадків реєструвалося збільшення рівня ФМФА, максимальна кратність підвищення активності якого становила 30,1. Збільшення активності ФМФА спостерігається не тільки у хворих на вірусний гепатит, але і у хворих на інфекційний мононуклеоз. Дуже важливим є, з нашої точки зору, то, що збільшення активності ензиму, як правило, не відзначається при ураженні печінки лейкемічних процесом, в той час як виявляється помірне наростання активності трансаміназ. Цей факт дозволяє використовувати визначення ФМФА для диференційно-діагностичних цілей. Зміна рівня ФМФА є показником ураження гепатоцитів і не поступається показникам ГПТ.

Глютаматдегідрогеназа (ГлДГ) - органоспецифічний ензим виключно мітохондріальної локалізації. Крім гепатоцитів в мінімальних кількостях він знаходиться в клітинах нирок, мозку, міокарда. ГлДГ грає важливу роль в амінокислотному обміні і циклі Кребса.

Наростання активності ензиму в сироватці крові спостерігається тільки при пошкодженні печінки, що було доведено шляхом проведення одночасних гістологічних та біохімічних досліджень.

Оскільки ензим локалізована в мітохондріях клітини і міцно пов`язаний з нею, підвищення його активності в сироватці крові свідчить про важкому ушкодженні гепатоцита (некроз або некробіоз).

У сироватці крові здорових осіб рівень активності ГлДГ не перевищує 2,0 од. (В межах від 0 до 2 од. Активності), що обумовлено міцним зв`язком ензиму з клітинними структурами.

За даними нашої клініки, середні показники фізіологічної норми складають 0,8 ± 0,1 од.

Відповідно до даних Butenandt, Qenscher рівень ензиму у новонароджених в сироватці крові знаходиться в тих же межах, що і у дорослих.

Встановлено значне підвищення активності ГлДГ у хворих на вірусний гепатит. При цьому ступінь збільшення відображає тяжкість захворювання. Особливо слід відзначити, що активність ГлДГ підвищується в сироватці крові і при механічної жовтяниці.

Активність ГлДГ при механічної жовтяниці сягає тих же цифр, як і у хворих на вірусний гепатит, а за даними А. І. Хазанова, Forster і Filippa, навіть перевищує такі. На думку названих авторів, збільшення активності ГлДГ спостерігається на тлі помірного підвищення рівня трансаміназ, що може бути викликано появою клітинних некрозів, пов`язаних із застоєм жовчі.

Ізоцитратдегідрогеназа (ІДГ). Ізоцитратдегідрогеназа каталізує окислення цитрату в а-кетоглютарат і двоокис вуглецю (реакція оборотна), каталізує перенесення водню від лимонної кислоти до TPN. 90% ензиму розташоване в цитоплазмі і лише 10% -у мітохондріях. Рівень активності ІДГ у здорових дітей не перевищує 2,2 од. За даними співробітника нашого відділу Л. А. Попова, Gross та ін., ІДГ слід розглядати як "ранній ензим", Т. Е. Ензим, активність якого наростає в сироватці крові на самому початку захворювання.

У спеціально проведеному визначенні активності ензиму у хворих ентероколітом, скарлатину і кашлюк не виявлено збільшення ІДГ. При неоплазм печінки активність ІДГ також не збільшувалася. Не було встановлено наростання активності ензиму при механічної жовтяниці. Watts, провівши обстеження 53 хворих з обтураційною жовтяницею, встановив, що активність ІДГ підвищується лише при вторинному пошкодженні печінки. Мабуть, визначення активності ІДГ є більш достовірним критерієм для діагностики в зв`язку з відсутністю його збільшення при ряді патологічних процесів у печінці, крім вірусного гепатиту. При цьому автори підкреслюють, що максимальне збільшення активності ІДГ співпадає з таким ГЩТ.

Разом з тим, Saad і ін. Спостерігали збільшення активності ІДГ не тільки при вірусному гепатиті, але і при токсичному пошкодженні гепатоцитів.

Таким чином, визначення активності ІДГ має диференційно-діагностичне значення.

Гуаніндезаміназа (ГД) -каталізірует перетворення гуаніну в ксантин, відноситься до групи органоспецифічних ензимів і розташована в цитоплазмі клітини. ГД була виявлена в печінці і селезінці людини. Levine і ін., Вивчаючи активність ГД в тканинах встановили, що висока активність ензиму реєструється в печінці, нирках і мозку, помірна - у кишечнику і низька - в шлунку, підшлунковій залозі, серці, селезінці, яєчниках, еритроцитах.

У 1965 р Knights та ін. Виявили значне збільшення активності ГД у хворих на вірусний гепатит. Це підвищення виникає в ранньому періоді захворювання і в подальшому швидко знижується. Названі автори не виявили збільшення активності ГД у хворих на гострий панкреатит, міокардитом, лімфосаркома, виразковим колітом і в деяких випадках при обтураційній жовтяниці. У хворих з біліарним цирозом і карциномою підшлункової залози відзначено помірне підвищення активності ГД. Knights та ін. Після перев`язки загальної жовчної протоку не виявили також наростання активності ГД.

Caraway, застосувавши колориметрический метод -Визначення активності ГД в сироватці крові, встановив межі фізіологічної активності (до 3 од.). У хворих на вірусний гепатит збільшення активності ГД спостерігалося паралельно з наростанням активності ГПТ. Збільшення активності ГД при вірусному гепатиті виявлено в дослідженнях В. В. Нечаєва, Є. А. Жукової, А. Д. Бріскер і В. Н. Григорчук.

Аденозіндезамінази (АТ) є цитоплазматическим ензимом, що каталізує дезамінування аденозину і беруть участь у метаболізмі нуклеїнових кислот-незважаючи на відносно невисокий вміст ензиму в гепатоцитах, відзначено виражене і постійне збільшення його активності в сироватці крові при гепатоцелюлярних пошкодженнях у дорослих, хворих на вірусний гепатит.

У вітчизняній літературі ці дослідження у дорослих наведені тільки І. Н. Пуні, а у дітей - Е. А. Жукової.

Лужна фосфатаза (ЛФ). У 1933 р Roberts запропонував новий диференційний метод для діагностики паренхіматозних і механічних жовтяниць за допомогою визначення активності ЛФ в сироватці крові. В останні роки з`явилися роботи, які свідчать про наявність ізоферментів лужної фосфатази.

ЛФ в мембранах клітин міститься в печінці, в системі жовчних капілярів, тонкому кишечнику, нирках.

ЛФ міститься також в цитоплазмі клітин - остеобластів скелетної системи, в гранулоцитарних лейкоцитах, в ретикулоендотеліальних клітинах кісткового мозку і селезінці, а також в ендотелії кровоносних судин.

При механічних жовтяниці активність лужної фосфатази збільшується.

ЛФ з жовчних капілярів в фізіологічних умовах може бути виявлена лише в жовчі, в той час як ЛФ з гепатоцитів знаходиться в сироватці і жовчі постійно.

При гепатоцелюлярної жовтяниці наростає активність ензиму в сироватці крові. Природно, що при холестазі переважно збільшується активність ЛФ, виробляється в жовчних капілярах.

Разом з тим, більшість дослідників відзначають, що активність ГД збільшується лише на початку захворювання вірусним гепатитом (раніше збільшення активності ГЩТ з швидкою подальшою нормалізацією). Таким чином, цей тест придатний для ранньої діагностики вірусного гепатиту.

Аналіз діагностичної цінності ензимів з різною внутрішньоклітинною локалізацією був проведений Gross та ін. При обстеженні контактних колективів.

Автори показали послідовність збільшення наступних ензимів: альдолази (АЛ), ізоцитратдегідрогенази (ІДГ), лактатдегідрогенази (ЛДГ), щавелевоуксусной трансамінази (ГЩТ).

Активність АЛ і ІДГ підвищується значно раніше, ніж ЛДГ і ГЩТ. Автори вважають, що названі ензими з`являються в сироватці крові в значній кількості в самому початку захворювання або в кінці інкубації.

Зниження до нормального рівня показників ензимів відбувається в тому ж порядку.

Таким чином, автори показують, що для ранньої діагностики вірусного гепатиту краще використовувати визначення активності ІДГ, АЛ, ніж ГПТ і ГЩТ.

одночасне дослідження "ранніх" і "пізніх" ензимів дозволяє не тільки діагностувати вірусний гепатит, але і визначити фазу захворювання.

При підпечінковій (механічних) желтухах пухлинного генезу активність ферментів наростає в перші дні жовтяниці і залишається збільшеною протягом усього періоду хвороби.

Збільшення активності ферменту має місце при жовчнокам`яній жовтяниці, холециститі і холестатическом гепатиті за рахунок холестазу.

У хворих з гемолітичною жовтяницею активність ЛФ знаходиться в межах фізіологічної норми.

При паренхіматозних ушкодженнях печінки активність ЛФ або не змінюється, або змінюється помірно як в сторону збільшення, так і зниження показників.

Увага, тільки СЬОГОДНІ!